Каждый из них имеет свои достоинства и недостатки, например количественный метод абсорбции агглютининов недостаточно чувствителен, но позволяет избежать влияния загрязнений, методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации при определенных неточностях в выполнении методики могут привести к экспертным ошибкам, но зато очень чувствительны и могут быть использованы при очень малом количестве исследуемого вещества.
Отмеченными выше недостатками не обладает реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Она позволяет точно определить видовую и групповую принадлежность даже отдельной клетки. Суть этой методики в том, что антитела, меченные различными флюорохромами, вступают в контакт с антигенами, расположенными на поверхности объектов исследования, например на внешней оболочке сперматозоида. После удаления не прореагировавших антител остаются только соединившиеся с антигенами. При микроскопическом изучении объектов исследования в ультрафиолетовом свете наблюдается свечение в тех местах, где расположены искомые антигены. Таким образом, определяется не только наличие антигенов, но и их расположение на объекте.
В результате исследования объекта (объектов) эксперт-биолог обнаруживает или не обнаруживает в нем те или иные антигены и антитела. Если характер объекта таков, что эксперт точно уверен в его происхождении от одного человека, то по выявленному набору антигенов и антител он точно устанавливает, что объект относится к такой-то группе системы АВО. Установив группу, специалист сравнивает ее с группой крови потерпевшего и подозреваемого. При несовпадении групп эксперт делает вывод, что кровь не произошла от данного конкретного лица. При совпадении - делается вывод, что кровь могла произойти от конкретного человека.
Если эксперт не может быть уверен, что объект исследования образован кровью только одного лица, то сделать конкретный вывод об исключении или не исключении происхождения пятна крови от конкретного лица он не может. Например, при обнаружении в пятне крови антигена В, при неисключении смешивания крови, эксперт сделает вывод, что пятно могло быть образовано или кровью третей группы или кровью третей группы в смеси с кровью первой. На основании такого результата в качестве источника крови в данном пятне будут исключены лица со второй и четвертой группой и не исключены лица с первой и третьей.
Исходную информацию, для решения вопроса о возможном смешивании крови в исследуемом пятне, эксперт берет из протокола осмотра места происшествия и из других источников.
2. Система MNSs. В ней выделяются девять групп: MNSs, MNs, Ns, Mss, Ms, MS, NSs, MNS и Ns. Система весьма информативна для дифференцирования объектов. Однако, выявление изоантигенов этой системы более сложно чем системы АВО, кроме того они менее устойчивы во времени.
Принципы выявления антигенов этой системы такие же как для системы АВО.
3. Система резус Rh. Около 85% людей являются резус-положительными, 15% - резус-отрицательными. Система резус включает семь изоантигенов: D, С, С ,Е, d, с, е. В крови резус-положительных людей содержится хотя бы один из указанных антигенов. Возможные сочетания антигенов этой системы могут составить около ста различающихся групп. Антигены системы резус достаточно хорошо устанавливаются в жидкой крови и плохо в пятнах из-за низкой устойчивости, поэтому их исследование в судебной медицине ограничено.
4. Система Р. Антиген Р присутствует в крови примерно 70-80% европейского населения. По силе выраженности он может быть сильным, умеренным и слабым. Этот антиген имеет невысокую устойчивость во внешней среде. Если в пятне крови не выявляется антиген Р, то это может означать или то, что его там нет, или то, что он разрушился от действия внешних факторов, поэтому экспертное значение имеет только факт выявления этого антигена.
Возможности исследований по системе Р еще далеко не исчерпаны.
Установлено, что антиген этой группы может иметь несколько разновидностей, в дальнейшем в повседневную судебно-медицинскую практику может быть внедрено определение примерно десяти групп по этой системе.
Кроме указанных систем в эритроцитах, могут быть определены в практических целях: система Льюис (Le); система Келл-Челлано (К); система Лютеран (Lu); система Даффи (Fy); система Кидд (lk).
Приведенный перечень эритроцитарных систем на этом не ограничивается, в него вошли только наиболее изученные в судебно-медицинском плане системы антигенов.
Исследование сывороточных систем
В плазме (сыворотке) крови человека содержится большое количество белков и липопротеидов. Кроме прочих различий, они отличаются друг от друга по антигенным свойствам. Системы плазмы крови, так же как и эритроцитарные, передаются по наследству и не связаны между собой. Их используют в судебно-медицинской практике с теми же целями, что и эритроцитарные.
Наиболее изучены и распространены на практике следующие из них:
1. Система гаптоглобина (Нр).
Гаптоглобин особый белок плазмы крови, относящийся к глобулинам. Выделяются три группы крови по гаптоглобину: Нр1-1, частота встречаемости 15%; Нр1-2, встречаемость 50%; Нр2-2, встречаемость 35%.
Разновидности гаптоглобина имеют разный молекулярный вес, поэтому могут быть обнаружены методом электрофореза в геле.
На результат выявления гаптоглобинов влияют разные факторы, но наибольшее негативное воздействие оказывает характер следонесущей поверхности, получение результатов осложняется, если кровь находится на впитывающей поверхности.
2. Системы иммуноглобулинов.
Система Gm. В эту систему входят 23 варианта антигенов. Они обусловливают возможность разделения крови по этой системе на большое количество групп. Антигены этой системы хорошо сохраняются в пятнах крови.
Система Кт. Использование этой системы дает хорошие результаты в исключении отцовства.
Изучены и имеют определенное судебно-медицинское значение еще несколько систем плазмы крови.
Изоферментные системы
В организме человека, в крови и других тканях, функционируют многочисленные ферменты. Они, так же как и описанные выше биологические компоненты тканей, проявляют антигенные свойства, передаваемые по наследству. В судебно-медицинской практике нашли применение несколько ферментных систем: система фосфоглюкомутазы (ФГМ); система эритроцитарной кислой фосфотазы (КФЭ); система эстеразы (ЭсД); система аденилаткиназы (АК); система фосфоглюконатдегидрогеназы (ФГД) и др.
Разделение ферментных систем на группы производится с помощью различных модификаций электрофореза, основанного на том, что разные по весу молекулы или их части неодинаково передвигаются в геле под действием электрического тока.
Деление на группы по ферментным системам используется в судебной медицине для работы с жидкой кровью, дифференциации пятен крови и других биологических объектов.
35.3. Судебно-медицинское исследование жидкой крови
В правоохранительной деятельности необходимость сравнительного исследования жидкой крови возникает значительно реже, чем необходимость сравнения сухой крови с сухой или сухой с жидкой. Большая часть таких случаев связана с установлением отцовства и материнства, т.е. факта происхождения ребенка от конкретных женщины и мужчины.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114
Отмеченными выше недостатками не обладает реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Она позволяет точно определить видовую и групповую принадлежность даже отдельной клетки. Суть этой методики в том, что антитела, меченные различными флюорохромами, вступают в контакт с антигенами, расположенными на поверхности объектов исследования, например на внешней оболочке сперматозоида. После удаления не прореагировавших антител остаются только соединившиеся с антигенами. При микроскопическом изучении объектов исследования в ультрафиолетовом свете наблюдается свечение в тех местах, где расположены искомые антигены. Таким образом, определяется не только наличие антигенов, но и их расположение на объекте.
В результате исследования объекта (объектов) эксперт-биолог обнаруживает или не обнаруживает в нем те или иные антигены и антитела. Если характер объекта таков, что эксперт точно уверен в его происхождении от одного человека, то по выявленному набору антигенов и антител он точно устанавливает, что объект относится к такой-то группе системы АВО. Установив группу, специалист сравнивает ее с группой крови потерпевшего и подозреваемого. При несовпадении групп эксперт делает вывод, что кровь не произошла от данного конкретного лица. При совпадении - делается вывод, что кровь могла произойти от конкретного человека.
Если эксперт не может быть уверен, что объект исследования образован кровью только одного лица, то сделать конкретный вывод об исключении или не исключении происхождения пятна крови от конкретного лица он не может. Например, при обнаружении в пятне крови антигена В, при неисключении смешивания крови, эксперт сделает вывод, что пятно могло быть образовано или кровью третей группы или кровью третей группы в смеси с кровью первой. На основании такого результата в качестве источника крови в данном пятне будут исключены лица со второй и четвертой группой и не исключены лица с первой и третьей.
Исходную информацию, для решения вопроса о возможном смешивании крови в исследуемом пятне, эксперт берет из протокола осмотра места происшествия и из других источников.
2. Система MNSs. В ней выделяются девять групп: MNSs, MNs, Ns, Mss, Ms, MS, NSs, MNS и Ns. Система весьма информативна для дифференцирования объектов. Однако, выявление изоантигенов этой системы более сложно чем системы АВО, кроме того они менее устойчивы во времени.
Принципы выявления антигенов этой системы такие же как для системы АВО.
3. Система резус Rh. Около 85% людей являются резус-положительными, 15% - резус-отрицательными. Система резус включает семь изоантигенов: D, С, С ,Е, d, с, е. В крови резус-положительных людей содержится хотя бы один из указанных антигенов. Возможные сочетания антигенов этой системы могут составить около ста различающихся групп. Антигены системы резус достаточно хорошо устанавливаются в жидкой крови и плохо в пятнах из-за низкой устойчивости, поэтому их исследование в судебной медицине ограничено.
4. Система Р. Антиген Р присутствует в крови примерно 70-80% европейского населения. По силе выраженности он может быть сильным, умеренным и слабым. Этот антиген имеет невысокую устойчивость во внешней среде. Если в пятне крови не выявляется антиген Р, то это может означать или то, что его там нет, или то, что он разрушился от действия внешних факторов, поэтому экспертное значение имеет только факт выявления этого антигена.
Возможности исследований по системе Р еще далеко не исчерпаны.
Установлено, что антиген этой группы может иметь несколько разновидностей, в дальнейшем в повседневную судебно-медицинскую практику может быть внедрено определение примерно десяти групп по этой системе.
Кроме указанных систем в эритроцитах, могут быть определены в практических целях: система Льюис (Le); система Келл-Челлано (К); система Лютеран (Lu); система Даффи (Fy); система Кидд (lk).
Приведенный перечень эритроцитарных систем на этом не ограничивается, в него вошли только наиболее изученные в судебно-медицинском плане системы антигенов.
Исследование сывороточных систем
В плазме (сыворотке) крови человека содержится большое количество белков и липопротеидов. Кроме прочих различий, они отличаются друг от друга по антигенным свойствам. Системы плазмы крови, так же как и эритроцитарные, передаются по наследству и не связаны между собой. Их используют в судебно-медицинской практике с теми же целями, что и эритроцитарные.
Наиболее изучены и распространены на практике следующие из них:
1. Система гаптоглобина (Нр).
Гаптоглобин особый белок плазмы крови, относящийся к глобулинам. Выделяются три группы крови по гаптоглобину: Нр1-1, частота встречаемости 15%; Нр1-2, встречаемость 50%; Нр2-2, встречаемость 35%.
Разновидности гаптоглобина имеют разный молекулярный вес, поэтому могут быть обнаружены методом электрофореза в геле.
На результат выявления гаптоглобинов влияют разные факторы, но наибольшее негативное воздействие оказывает характер следонесущей поверхности, получение результатов осложняется, если кровь находится на впитывающей поверхности.
2. Системы иммуноглобулинов.
Система Gm. В эту систему входят 23 варианта антигенов. Они обусловливают возможность разделения крови по этой системе на большое количество групп. Антигены этой системы хорошо сохраняются в пятнах крови.
Система Кт. Использование этой системы дает хорошие результаты в исключении отцовства.
Изучены и имеют определенное судебно-медицинское значение еще несколько систем плазмы крови.
Изоферментные системы
В организме человека, в крови и других тканях, функционируют многочисленные ферменты. Они, так же как и описанные выше биологические компоненты тканей, проявляют антигенные свойства, передаваемые по наследству. В судебно-медицинской практике нашли применение несколько ферментных систем: система фосфоглюкомутазы (ФГМ); система эритроцитарной кислой фосфотазы (КФЭ); система эстеразы (ЭсД); система аденилаткиназы (АК); система фосфоглюконатдегидрогеназы (ФГД) и др.
Разделение ферментных систем на группы производится с помощью различных модификаций электрофореза, основанного на том, что разные по весу молекулы или их части неодинаково передвигаются в геле под действием электрического тока.
Деление на группы по ферментным системам используется в судебной медицине для работы с жидкой кровью, дифференциации пятен крови и других биологических объектов.
35.3. Судебно-медицинское исследование жидкой крови
В правоохранительной деятельности необходимость сравнительного исследования жидкой крови возникает значительно реже, чем необходимость сравнения сухой крови с сухой или сухой с жидкой. Большая часть таких случаев связана с установлением отцовства и материнства, т.е. факта происхождения ребенка от конкретных женщины и мужчины.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114